脂肪廣泛存在于許多植物的種子和果實(shí)中，測(cè)定脂肪的含量，可以作為鑒別其品質(zhì)優(yōu)劣的一個(gè)指標(biāo)。脂肪含量的測(cè)定有很多方法，如抽提法、酸水解法、比重法、折射法、電測(cè)和核磁共振法等。目前國(guó)內(nèi)外普遍采用抽提法，其中索氏抽提法（Soxhlet extractormethod）是公認(rèn)的經(jīng)典方法，也是我國(guó)糧油分折首選的標(biāo)準(zhǔn)方法。用索氏抽提法測(cè)定粗脂肪是最常用方法之一，但在使用中需要注意的方面很多。

1、樣品的前處理

一般采集或送檢的樣品都有500~1000g左右，因此在粉樣前應(yīng)先將樣品在樣品盤(pán)中用四分法反復(fù)混合均勻，原糧用糧食分樣器按操作規(guī)程分取樣品。在粉碎過(guò)程中應(yīng)盡量避免樣品發(fā)熱，若樣品在粉碎過(guò)程中發(fā)熱，應(yīng)注意等完全冷卻至室溫后再稱樣。試樣粗細(xì)度要適宜。試樣粉未過(guò)粗，脂肪不易抽提干凈;試樣粉末過(guò)細(xì)，則有可能透過(guò)濾紙孔隙隨回流溶劑流失，影響測(cè)定結(jié)果。有條件的建議使用錘式旋風(fēng)磨，效果較好。

2、稱取樣品

稱樣前應(yīng)提前30min開(kāi)啟天平，稱取樣品時(shí)，不要將樣品放在定性濾紙上直接稱量，而應(yīng)放在無(wú)水硫酸紙上稱量，因?yàn)槎ㄐ詾V紙吸水性太強(qiáng)，易造成誤差。樣品由于粗脂肪含量各不相同，因此在稱取時(shí)不同的料稱樣量也有差異，一般粗脂肪含量在10%以上的每個(gè)平行樣只需稱取1.5～2.0g，若在10%以下需稱取2.0～3.0g，定量稱取好的樣品應(yīng)用濾紙筒完全包好，裝樣品的濾紙筒一定要緊密，最好在樣品上方加一層脫脂棉;含多量糖及糊精的樣品，要先以冷水處理，等其干燥后連通濾紙一起放入濾紙筒。用脫脂線繩扎緊確保樣品不會(huì)漏出，濾紙包應(yīng)盡量緊湊，長(zhǎng)度不能長(zhǎng)于索氏脂肪提取器提取室的高度。稱取好的樣品應(yīng)在烘箱105~C士2℃烘2h以除去其中的水分。

那艾儀器 智能索氏提取器 型號(hào)：NAI-ST-6S

3、做好抽提準(zhǔn)備

(1）抽提瓶在使用前應(yīng)先檢查完全干凈后放人2~3粒干凈的沸石再放到烘箱中于105℃+2°℃烘2h，然后放于干燥器中冷30min，帶上干燥潔凈的手套稱取抽提瓶的重量，反復(fù)直至恒重(前后兩次稱量差不超過(guò)0.00o2g)，要求兩次烘干和干燥時(shí)間一致，第二次烘干時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)。

(2）使用索氏脂肪提取器前應(yīng)先檢查提取室應(yīng)干燥無(wú)水再用。水浴鍋在使用前應(yīng)檢查水面高度應(yīng)達(dá)鍋高的三分之二以上，要保證水面的高度超過(guò)提取瓶中乙醚的高度。冷凝管上端最好連接一個(gè)氯化鈣干燥管，這樣不僅可以防止空氣中水分進(jìn)入，而且還可以避免乙醚揮發(fā)流失在空氣中，也可防止實(shí)驗(yàn)室微小環(huán)境空氣的污染，如無(wú)此裝置，塞一團(tuán)干脫脂棉球亦可。

(3)水浴鍋的溫度應(yīng)設(shè)在60℃左右。回流的總次數(shù)為50～60次，每小時(shí)8~12次，時(shí)間為8個(gè)小時(shí)，含油高的樣品回流次數(shù)可增加至70次。加入乙醚的量一般為60~100ml。安裝抽提設(shè)備時(shí)應(yīng)注意抽提瓶和抽提室之間、抽提室和冷凝管之間的摩沙口一定要旋轉(zhuǎn)擰緊，連接后用洗瓶滴水檢查是否嚴(yán)密。

(4)乙醚必須使無(wú)水乙醚，因?yàn)槿绻衅渌奈镔|(zhì)，如水，就可能將樣品中的糖分或者無(wú)機(jī)物抽出，影響脂肪的測(cè)定結(jié)果。索氏抽提法測(cè)定脂肪最大的不足是耗時(shí)過(guò)長(zhǎng)，如能將樣品先回流1~2次，然后浸泡在溶劑中過(guò)夜，次日再繼續(xù)抽提，則可明顯縮短抽提時(shí)間。

4、抽提

在抽提過(guò)程中，經(jīng)常發(fā)生的問(wèn)題是:

(1)各冷凝管之間連接的膠管因使用時(shí)間過(guò)長(zhǎng)老化而被忽視常常發(fā)生漏水現(xiàn)象，在使用前應(yīng)注意檢查，及時(shí)更換。在抽提過(guò)程中一定要注意各冷凝管之間連接的膠管擺放通暢，否則會(huì)影響冷凝管中水的流通，導(dǎo)致發(fā)生乙醚揮發(fā)流失的情況，因此在提取的過(guò)程中一定要經(jīng)常觀察水流是否通暢，水壓是否穩(wěn)定。有異常現(xiàn)象要及時(shí)調(diào)整，實(shí)驗(yàn)中經(jīng)常因連接膠管擺放不暢使回水不通，乙醚流失停止回流。

(2)必須十分注意乙醚的安全使用。抽提室內(nèi)嚴(yán)禁有明火存在或用明火加熱。乙醚中不得含有過(guò)氧化物，保持抽提室內(nèi)良好通風(fēng)，以防燃爆。乙醚中過(guò)氧化物的檢查方法是:取適量乙醚，加入碘化鉀溶液，用力搖動(dòng)，放置1min，若出現(xiàn)黃色則表明存在過(guò)氧化物，應(yīng)進(jìn)行處理后方可使用。處理的方法是:將乙醚放入分液漏斗，先以1/5乙醚量的稀KOH溶液洗滌2~3次，以除去乙醇;然后用鹽酸酸化，加入1/5乙醚量的FeSO4或Na2SOa溶液，振搖，靜置，分層后棄去下層水溶液，以除去過(guò)氧化物;最后用水洗至中性，用無(wú)水CaCl:或無(wú)水Na2SO4脫水，并進(jìn)行重蒸餾。

5、回收

(1)回流前往提取室加乙醚或回流結(jié)束回收乙醚時(shí)注意打開(kāi)通風(fēng)系統(tǒng)。以盡量減少乙醚揮發(fā)對(duì)人體的危害。抽提結(jié)束后回收乙醚，小心地從水浴鍋中將底瓶放穩(wěn)在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，回收時(shí)最好有兩個(gè)人配合操作，確保達(dá)到萬(wàn)無(wú)一失。

(2）回收的乙醚不能再用于抽提粗脂肪，應(yīng)在乙醚瓶外標(biāo)明。將抽提室中的濾紙包倒出后，抽提室不要水洗即可放置在適當(dāng)?shù)牡胤健?/p>

(3）用濾紙或脫脂棉擦凈提取瓶的外部然后放于烘箱中于105℃±+2℃烘2h，取出放于干燥器中半個(gè)小時(shí)后稱重，再將提取瓶放于烘箱中烘30min冷卻后稱量，兩次稱量差不超過(guò)0.0002g即為恒重。將提取瓶放在烘箱內(nèi)干燥時(shí)，瓶口向一側(cè)傾斜45度防止揮發(fā)物乙醚易與空氣形成對(duì)流，這樣干燥迅速。這里恒重的概念有區(qū)別，它表示最初達(dá)到的最低重量，即溶劑和水分完全揮發(fā)時(shí)的恒重，此后若在繼續(xù)加熱，則因油脂氧化等原因會(huì)導(dǎo)致重量增加。在干燥器中的冷卻時(shí)間一般要一致。此時(shí)烘干時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，因?yàn)橐恍┎伙柡椭舅?，容易在加熱過(guò)程中被氧化而影響脂肪測(cè)定的最終結(jié)果。在沒(méi)有真空干燥箱的條件下，只可以在100～105℃下干燥1.5～3小時(shí)。

6、測(cè)定結(jié)果

樣品含量在10%以上時(shí)，相對(duì)偏差允許3%;在10%以下時(shí)，允許相對(duì)偏差5%。否則重做。